Embriogénesis somática en tres especies de orquideas : Cattleyopsis lindenii, Myrmecophila tibicinis y Laelia rubescens / Sara Luz Nahuat Dzib

Tesis (Doctor en Ciencias en Bioquímica) .-- Instituto Tecnológico de Mérida, 2001.

La familia de las orquideas es la más grande entre las plantas con flores. Su vistocidad y alta demanda comercial ha provocado su explotación y saqueo indiscriminado de su habitat natural, unido a esto, la tala indiscriminada de la selva y de los bosques, así como la consecuente modificación del hábitat las ha ubicado entre las especies vegetales en peligro de extinción. Considerando que su semilla es muy pequeña, con una extremadamente baja capacidad de germinación (5 -10 por ciento) por carecer de endospermo y para que este evento ocurra es indispensable que se establezca una micorriza, resulta importante desarrollar métodos eficientes para la propagación de estas especies. El objetivo del presente trabajo, es el establecimiento de una metodologíam para la inducción de la embriogénesis somática de las especies de orquídea: Myrmecophila tibicinis Rolfe, Cattleyopsis lindenii Lindley y Laelia rubescens, definiendo los parámetros que aseguren la conversión adecuada de los embriones somáticos a plantas, así como la caracterización histológica de dicho proceso. Para la consecución de los objetivos, se desarrollaron diferentes investigaciones encaminadas a evaluar el comportamiento del índice de oxidación fenólica, resultando la más adecuada, la concentración de 50mg/l de Cisteína-HCl la cual redujo la fenolización a menos del 10 por ciento en las especies estudiadas. Se evaluó el efecto de diferentes formulaciones basales (Knudson C., 1946; Murashige y Skoog, 1962), y el efecto de fotoperíodo de 16 horas luz : 8 horas oscuridad, sobre la morfogénesis de las tres especies evaluadas, encontrándose la mejor respuesta con el medio MS y fotoperiodo. También se evaluó el efecto de las uxinas (2,4-D) ANA, AIA, Y AIB) y de las citocininas (Kinetica y el BAP) obteniéndose la mejor respuesta con la combinación de ANA, AIA Y BAP en concentraciones de 2 mg/l en el medio de cultivo. Otros aspectos evaluados fueron el comportamiento de la capacidad multiplicativa de los embriones somáticos y el efecto del tiempo de subcultivo, sobre el índice de multiplicación, alcanzando el mayor índice de multiplicación con tiempos de subcultivo de 30 días. Durante la conversión y desarrollo de los embriones somáticos (ESs) en plantas, fue estudiada la influencia de diferentes medios de cultivo, resultando nuevamente el mismo medio MS adicionado con los tres reguladores como el mas adecuado para la conversión de los ESs a plántulas. Para la adaptaciónde las vitroplantas a las condiciones ex vitro, las plantulas con una altura mínima de 4 cm. mostraron la mejor capacidad para establecerse, sobrevivir y desarrollarse. Así mismo, se realizó la caracterización histológica de la embriogénesis somática de orquídea, constatándose que la morfogénesis en orquídea bajo las condiciones establecidas en este estudio, ocurre vía embriogénesis somática.