Caracterización de la actividad de WUSCHEL en Coffea canephora / Ana Ly Arroyo Herrera

Tesis (Doctorado en Ciencias y Biotecnología de Plantas) .-- Centro de Investigación Científica de Yucatán, 2008.

El factor de transcripción WUSHEL (WUS) es requerido específicamente para el mantenimiento de la identidad de las células madre en los meristemos ápicales Y florales, manteniendo así su estructura e integridad funcional. WUS pertenece a la familia de proteínas de homeodominio la cual contiene un dominio típico y su tamaño es de 60 aminoácidos. La expresión de WUS ha sido observada en etapas tempranas de la embriogénesis. En el presente trabajo se determinó la caracterización de la actividad de WUSCHEL en Coffea canephora, así como la caracterización de la sobre expresión de WUS. Para determinar su actividad WUS fue aislado, clonado, expresado y purificando. Se obtuvo un fragmento de 893 pb, el cual fue clonado en un vector de expresión de proteínas recombinantes. Se obtuvo una proteína de entre 28 Y 29 kDa la cual fue purificada por afinidad, la cual corresponde a la masa molecular esperada para WUS. En la sobre-expresión de WUS en Coffea canephora, se utilizó un sistema inducible. Las manifestaciones de la sobre-expresión de WUS en plantas de café produjo la formación de callo y en la inducción de embriones somáticos, causó un incremento de éstos en un producción de 400 por ciento. Este es el primer reporte de un sistema de inducción de embriogénesis que utiliza a WUS el cual podría ser usado como herramienta para la inducción de embriogénesis en otras especies.