Expresión de las ARN polimerasas IV y V en Oryza sativa / Leydi del Rocío Canché Moo

Tesis (Doctorado en Ciencias y Biotecnología de Plantas) .-- Centro de Investigación Científica de Yucatán, 2012.

Las ARN Poi IV y V son proteínas involucradas en el silenciamiento génico dirigido por los siARN, y metilación de novo del ADN respectivamente. Las ARN Poi IV y V son expresadas en todos los tejidos de A. thaliana con una mayor expresión en inflorescencia y raíz. Dentro de las células se localiza en el núcleo. ARN poi IV y V se encuentran conformadas por doce subunidades. Estas polimerasas comparten subunidades con la ARN Poi II, con la que tiene similitud en la secuencia y posiblemente en estructura. La carencia de expresión de estas ARN polimerasa en las líneas mutantes A. thaliana resulta en un retraso de floración, así como alteraciones en la formación de sus órganos florales. A la fecha se han encontrado las secuencias de la ARN Poi IV y Ven diversas plantas incluyendo a O. sativa. Debido a la importancia de 0. sativa tanto industrialmente como de uso de modelo vegetal en monocotiledóneas fue que se realizó este estudio. En donde se plateo analizar el patrón de expresión de la ARN Poi IV y Ven 0. sativa. Utilizando tanto tejidos maduros como embriogénicos para este estudio. Embriones somáticos fueron generados con el fin de obtener una mayor cantidad de células en los primeros estados de desarrollo. Teniendo en cuenta que la reorganización nuclear y silenciamiento génico seria altamente expresado en estas fases de desarrollo. Para el desarrollo de este trabajo se realizó el alineamiento de secuencias de aminoácidos de las ARN Poi IV y V de A. thaliana y O.sativa, para obtener secuencias adecuadas para la síntesis de péptidos que fueran útiles para la producción de anticuerpos. Los péptidos generados permitieron obtener dos anticuerpos policlonales contra la subunidad uno de las ARN Poi IV y un anticuerpo contra la subunidad uno de la ARN poi V. Con estos anticuerpos se detectó la presencia de las ARN Poi IV y V, en 0. sativa en los tejidos de inflorescencia, hoja, tallo y raíz al igual que en embriones somáticos y cigoticos Los embriones somáticos de 0. sativa fueron obtenidos a partir de la inducción de los escutelos en medio EIM con 2,4-D. En estos embriones se inmunolocalizó alas ARN Poi IV y Ven el núcleo de las celulas. En base a la información publicada es probable que la participación de estas proteínas sea importante para el silenciamiento génico y reorganización nuclear que ocurre en el proceso de embriogénesis somática.