Estudio de la metilación del ADN en plantas micropropagadas de banano / Santy Peraza Echeverría

Tesis (Maestría en Ciencias y Biotecnología de Plantas) .-- Centro de Investigación Científica de Yucatán, 2000.

La propagación de plantas a través del cultivo de tejidos puede inducir una variedad de cambios genéticos y epigenéticos. La variación en los patrones de metilación del ADN ha sido propuesta como un mecanismo que puede explicar al menos una parte de estos cambios. En este estudio se evaluó la ocurrencia de cambios en la metilación de ADN en plantas micropropagadas del banano "Enano Gigante" (Musa, AAA) a partir de los explantes de inflorescencia masculina y de hijuelo, así como en plantas propagadas convencionamente, utilizando la técnica de amplificación de polimorfismos sensibles a la metilación (por sus siglas en inglés MSAP). Esta técnica utiliza como enzimas de restricción a la pareja de isosquizómeros Msp I y Hpa II, las cuales presentan una sensibilidad diferencial a la metilación de la citicina en la secuencia 5´-CCGG-3´. La técnica MSAP resultó ser útil para la detección de eventos de metilación del ADN en el genoma de plantas de banano. En total se detectaron 107 eventos de metilación del ADN en el genoma de plantas micropropagadas de 465 bandas o fragmentos cortados por una o ambas enzimas utilizando 8 combinaciones de iniciadores (23 del total de bandas). El mayor número de polimorfismos en la metilación del ADN se detectó en el genoma de plantas micropropagadas a partir de inflorescencia masculina, con un total de 14 bandas polimórficas (3 por ciento), mientras que el menor número de polimorfismos se detectó en plantas derivadas de hijuelo con 8 bandas polimórficas (1.7 por ciento). No se logró detectar la ocurrencia de polimorfismos en la metilación del ADN en las plantas propagadas convencionalmente, lo cual sugirió que el polimorfismo en la metilación del ADN se encuentra asociado con la micropropagación. No se encontraron diferencias estadísticamente significativas en el nivel de polimorfismos de la metilación de ADN entre las plantas micropropagadas a partir de los explantes de inflorescencia masculina y de hijuelo. Se sugieres que el explante no influye en el nivel de polimorfismo de la metilación de ADN observado en las plantas micropropagadas, sin embargo, se discute la necesidad de trabajos posteriores que se dirijan a aportar más evidencias al respecto.