Estudio de diferentes estrategias para promover la embriogénesis somática en cocotero (Cocos nucifera L.) a partir de explantes de plúmula / Alfonso Azpeitia Morales

Tesis (Doctorado en Ciencias y Biotecnología de Plantas) .-- Centro de Investigación Científica de Yucatán, 2003.

En los últimos años, la enfermedad conocida como amarillamiento letal del cocotero ha ocasionado la desaparición de aproximadamente 15 mil ha en la península de Yucatán y su avance continua hacia los estados del Golfo de México y del Pacífico. Aunado a este problema el 80 Por ciento de las plantaciones son improductivas porque estas rebasan los 40 años de edad, por lo que se requiere producir alrededor de 32 millones de palmas de cocotero resistentes. La escasez de material hace necesario contar con un método de multiplicación masiva, a través de la micropropagación. El uso de explantes de plúmula de cocotero ha tenido progresos importantes para el desarrollo de un protocolo reproducible, sin embargo la eficiencia en la regeneración de plantas es todavía baja. Los resultados de los estudios histológicos y morfológicos de la embriogénesis sornática mostraron que el meristemo apical no contribuye a la formación del callo inicial, mientras que las hojas de la plúmula juegan un papel importante en la formación de callo inicial y callo embriogénico. Las células de la periferia de este órgano participan en la formación de los nódulos meristemáticos y embriones somáticos, este estudio permite entender mejor al proceso embriogénico en cultivos de plúmula. Los estudios con citocininas exógenas (BAP, zeatina y 2iP) indicaron que no favorecen la formación de callo embriogénico (CE). La inhibición de CE está asociado probablemente a los niveles endógenos de citocininas en esta especie debido a que cuando se utilizó la 8-azaadenina (una anticitocinina) en 4.5 y 9 uM se obtuvo 65 Por ciento de CE, esto significó un incremento del 23.8 Por ciento respecto al control, además, con 4.5 uM se obtuvieron 8.8 embriones somáticos (ES), lo que representa un 52.51 Por ciento de incremento en relación al control. El empleo del brasinoesteroide 22(S), 23(S)-homobrasinolido (HBr) en 0.01 y 0.1 uM (precultivo de 3 días), permitió la formación de CE en 90 Por ciento y con 12 ES/CE lo que significó un incremento del 42.2 Por ciento en formación de CE y del 100 Por ciento en ES con relación al control. Los CE formados en medio con HBr, morfológicamente mostraron una gran abundancia de estructuras nodulares e histológicamente presentaron la ocurrencia de nódulos meristemáticos en su periferia y en su interior. Cuando los CE fueron subdivididos en 4 partes, los resultados permitieron observar que el número de embriones somáticos se incrementó presentándose ES tipo torpedo principalmente y en mayor sincronización con respecto a CE. Por último, los resultados obtenidos con una combinación de 90 uM de ácido abscísico + 15 gL -1 de polietilénglicol favoreció la formación de ES, obteniendo 10.5 ES (75 Por ciento mayor al control) y 3 plantas por CE (71 Por ciento más que el control). Un total de 30 plantas fueron aclimatizadas y presentaron una sobrevivencia del 90 Por ciento en invernadero. Los resultados obtenidos en este estudio son prometedores considerando el lento progreso de la investigación en la micropropagación de esta especie considerada como recalcitrante. La combinación e integración de diferentes estrategias incluyendo el uso de brasinoesteroides, anticitocininas, ácido abscísico/polietilenglícol, y algunas otras que han mostrado resultados promisorios como el ácido giberélico y la embriogénesis secundaria podrán mejorar significativamente la eficiencia de la regeneración in vitro de cocotero siempre y cuando sus efectos sean acumulativos.