Efecto del aluminio sobre la regulación del ciclo celular en suspensiones celulares de Coffea arabica L. / Juan Gualberto Collí Mull

Tesis (Maestría en Ciencias y Biotecnología de Plantas) .-- Centro de Investigación Científica de Yucatán, 2003.

El aluminio (Al) es el metal más abundante en la corteza terrestre, ya que representa alrededor del 7 por ciento de todos los elementos. La disponibilidad del A13+ para poder ser absorbido por las raíces de las plantas depende de la acidez del suelo porque esta determina la disponibilidad del Al, a medida que el pH del suelo se torna más ácido, mayor es su disponibilidad. El principal síntoma de la toxicidad por el A13+ es la inhibición del crecimiento de las raíces, por lo que se podría inferir que el aluminio está afectando algunos procesos involucrados en la división celular. En el presente trabajo se determinó el efecto del aluminio sobre algunos componentes involucrados en la regulación del ciclo celular en suspensiones celulares de Coffea arabica L. El aluminio inhibió hasta un 50 por ciento la síntesis de AON durante los días 6 y 7 del ciclo de cultivo cuando las células fueron tratadas con 100 OM de AICI3 durante 24 horas. También se pudo inmunodetectar a una proteína tipo antígeno nuclear de proliferación celular en los extractos proteicos totales y se observó que el tratamiento con AICI3 por 24 horas no indujo cambios en la cantidad de proteína. También, se detectó actividad de cinasa de la proteína cdc2a, empleando a la proteína p13 acoplada a sefarosa para precipitar a cdc2a y utilizando a la histona H1 como sustrato. Los parámetros evaluados para determinar las condiciones óptimas de ensayo de cinasa fueron: cantidad de proteína en los extractos totales, concentración de la histona H1 y el tiempo de incubación de la reacción del ensayo de cinasa; los parámetros seleccionados para monitorear la actividad de cdc2a fueron 100 mg de proteína total, 50 og de la histona H1 y 15 minutos de la reacción de cinasa. En cuanto al efecto provocado por el AICI3 sobre la actividad de cinasa de la proteína cdc2a, se observó una inhibición de la actividad cuando las células fueron tratadas con 100 OM de AICI3 y este efecto observado fue dependiente del tiempo de tratamiento. Por último, logramos la amplificación y la clonación de un AON complementario correspondiente a un fragmento de alrededor de 600 pares de bases que pertenece a una parte de la región amino terminal de la proteína cdc2a en donde se encuentra el motivo PSTAIRE, característico de estas proteínas cinasas. Todos los resultados obtenidos en este trabajo, sugieren que el Al tiene un efecto sobre algunos de los principales componentes de la división celular como es el caso de la síntesis del AON y sobre la principal proteína reguladora del ciclo celular, la cinasa cdc2a.