Determinación de la expresión de la enzima ARN polimerasa IV en tejidos de arroz (Oryza sativa) / Martha Beatriz Canto Bustos

Tesis (I.B.) .-- Instituto Tecnológico de Mérida, 2006.

En organismos eucariontes, existen tres ARN polimerasas que transcriben el genoma de ADN a ARN. Cada polimerasa tiene propiedades diferentes en función de su localización en el núcleo, de los genes que transcriben, además de la cantidad y tipo de subunidades que las conforman. De acuerdo con lo estudios de Onodera et al., 2005 se descubrió en Arabidopsis thaliana una cuarta clase de ARN polimerasa además de las ARN Polimerasas 1, 11, Y 111. El estudio de esta enzima nos brinda el conocimiento para el desarrollo de tecnologías avanzadas que permitan la mejora genética de otras especies de gran importancia nutricional a nivel mundial como el arroz, ya que dicha enzima esta involucrada en la producción de siRNAs, por lo que, en esté trabajo se analizó la presencia de la expresión transcripsional de la ARN polimerasa IV en tejidos de arroz (Oryza sativa) , por medio de oligonucleótidos específicos y RT- PCR. Con este fin, los objetivos de este trabajo fueron: (a) establecer una metodología adecuada para la obtención de cal/os y cultivos celulares de Oryza saliva a partir de cariópsides; (b) determinar la metodología para la extracción de ARN de Oryza saliva y (c) aplicar térnicas de RT -PCR para la amplificación de fragmentos específicos de ADN de arroz. Se presentó una amplificación leve en tejido de hoja de campo y una clara amplificación en tejido de raíz, lo que indica que la secuencia de ARN polimerasa IV se expresa transcripcionalmente en estos tejidos de Oryza saliva. El resultado negativo en tejidos de callos y células en suspensión no demuestra concisamente la ausencia o presencia de la ARN polimerasa IV en células con funciones especificas o desdiferenciadas.