Regeneración in vitro de chile habanero (Capsicum chinense Jacq.) bajo diferentes condiciones de cultivo. Efecto del paclobutrazol y el sistema de inmersión temporal (SIT) / Jericó Jabín Bello Bello

Tesis (Maestría en Ciencias y Biotecnología de Plantas) .-- Centro de Investigación Científica de Yucatán, 2007.

Dada la gran importancia que tiene el chile habanero en la región, así como la creciente demanda de este producto en el mercado, tanto nacional como internacional, se viene desarrollando un programa de mejoramiento genético basado en el estudio, identificación y uso eficiente de los recursos genéticos existentes en al región de Yucatán, considerada esta, centro de reserva genética de la especie Capsicum chienese Jacq. Como parte de todo ese estudio, se realizó este trabajo en el que se propone un protocolo que permite la regeneración in vitro de plantas de chile habanero, vía organigénesis directa. Se evalúo el efecto de la consistencia del medio de cultivo MS semisolido y líquido) sobre la formación de brotes. En medio líquido, los explantes fueron sometidos a diferentes condiciones de exposición al medio. 1) totalmente sumergidos, 2) parcialmente sumergidos, y 3) sobre un soporte de poliuretano (esponja). Bajo estas condiciones se estudió el contenido de etileno en recipientes con o sin ventilación y las implicaciones de este gas regulador en el desarrollo de los brotes. Por otro lado, se evaluó la edad fisiológica del explante sobre la inducción de brotes. Por otro lado, se evaluó la edad fisiológica del explante sobre la inducción de brotes de chile habanero, el efecto de tidiazuron (TDZ) y el paclobutrazol (PAC). Se evaluaron además, diferentes medios de cultivos para la elongación y enraizamiento de los brotes, así como el comportamiento e índice de multiplicación de los brotes de chile habanero, cultivados bajo condiciones de inmersción temporal (SIT). Como resultado fue detectado y cuantificado el contenido de etileno en los recipientes sin ventilar, en concentraciones superiores a los 0.2 uL. L-1 a los 25 días de cultivo in vitro. Así mismo, se estableció un protocolo donde se combinan dos sistemas de cultivo. Primera etapa: cultivo de nudos en medio semisólido para la inducción de brotes múltiples, y segunda etapa: cultivo bajo condiciones de inmersión temporal para la elongación y enraizamiento de los brotes. Los mejores resultados para la induicción de brotes fueron obtenidos en medio MS semisólido conteniendo TDZ (3.4uM) y PAC (3.4 uM) al utilizar explantes de plantas de 65 días de edad, en recipientes ventilados. Bajo estas condiciones se obtuvo por primera vez en la especie y en el género Capsicum, neoformaciones o formaciones de novo u organogénesis directa. Aunque no se logró la regeneración de brotes en el biorreactor modular de inmersión temporal (BoMINT), resultó mejor sistema para lograr la elongación y enraizamiento de brotes, especialmente cuando se sometieron a una frecuencia de 2 minutos de inmersión cada 8 horas. La mejor composición del medio para inducir la elongación de los brotes estuvo formada por: MS + GA3 (2.77 uM) + Ag NO3 (10uM), mientras que para el enraizamiento de los brotes el medio fue MS + AIA (1.70 uM). En ambos medios de cultivo líquido, los brotes desarrollados fueron más vigorosos en menor tiempo que en sentido semisólido. Durante la elongación de los brotes se observó una alta frecuencia de neoformaciones, que posteriormente se convirtieron en brotes (25 a 30 brotes por explante). El protocolo que estamos proponiendo es actualmente el más eficiente y reproducible, superando los resultados reportados para la especie C. chinense Jacq., incluso para el género Capsicum.