Identificación y aspectos epidemiológicos de los fitoplasmas que infectan al papayo (Carica papaya L.) en la Península de Yucatán, México / Abelardo Elías Navarrete Yabur

Tesis (Doctor en Ciencias Agropecuarias) .-- UADY. Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia, 2007.

Las enfermedades causadas por fitoplasmas en los papayos fueron estudiadas por un período de 3 años, usando herramientas moleculares. La investigación se realizó mediante un plan de muestreo de plantas de papayos, arvenses e insectos del orden Hemiptera y un experimento de transmisión de fitoplasmas por insectos. Las muestras se colectaron en los estados de Campeche, Yucatán y Quintana Roo, de la península de Yucatán en México. Para identificar la presencia de fitoplasmas que infectaban los papayos, se colectaron 534 muestras de plantas sintomáticas y 35 asintomáticas, ambos grupos incluyeron plantas del cultivar maradol, del papayo silvestre y del cultivar criollo. Así mismo para conocer a las arvenses que son hospedantes alternativas de estos patógeno s se colectaron un total de 130 plantas arvenses. Noventa presentaban sintomatología compatible con infección por fitoplasmas y 30 fueron asintomáticas. Adicionalmente se colectaron muestras de 1364 insectos pertenecientes a ocho familias con el fin de determinar cual de estos puede participar como vector. La técnica de reacción en cadena de la polimerasa, en su variante anidada (nested PCR por sus siglas en inglés) fue utilizada para la detección de fitoplasmas. Se amplificó un fragmento de 1.2 Kb del gen 16Sr, utilizando los oligonucleótidos universales R16rnF2/R16mR1 y los R16F2/R2, para la primera y segunda ronda de amplificación respectivamente. Para identificar el grupo de los fitoplasmas, se digirieron los productos amplificados con las enzimas de restricción AluI, HpaI, MseI, Dra!, HaeI, Rsa! y HhaI para obtener el análisis del polimorfismo de la longitud del fragmento de restricción (RFLP por sus siglas en inglés). Además, los fragmentos amplificados de 1.2 Kb fueron secuenciados. El ADN de fitoplasmas fue detectado en el 36 por ciento de los papayos sintomáticos. El 74 por ciento de las arvenses colectadas fueron positivas. Las arvenses con sintomatología y PCRpositivas que se encontraron con mayor frecuencia asociadas al papayo fueron: Cnidoscolus sp. (Euphorbiaceae), Lantana camara (Verbenaceae), Waltheria americana (Malvaceae), y Rinchosia mínima (Fabaceae). Los insectos Colpoptera rotunda (Issidae), Oncometopia clarior (Cicadellidae), Guayaquila pallescens (Membracidae), Spissistilus festinus (Membracidae) y Mitrapsylla sp. (psillydae), fueron encontrados en papaya y arvenses, siendo C. rotunda yO. clarior positivos a fitoplasmas. Los patrones de la restricción y las secuencias obtenidas indican que los fitoplasmas que se encontraron en papayo s pertenecen a los grupos 16Srl-B, 16Srm-B, 16SrlX-B y 16SrXIII. Los tres primeros grupos también fueron detectados en las arvenses. El experimento de transmisión de fitoplasmas fue realizado utilizando el insecto C. rotunda, en las tres accesiones de papayo. Los resultados de este experimento demostraron C. rotunda es un vector capaz de transmitir los grupos 16Srl-B y 16Srm-B de fitoplasrnas a los papayos. Los resultados indican que en la Península de Yucatán los papayos son susceptibles a infectarse con fitoplasma de los grupos 16Srl-B, 16Srm-B, 16SrlX y 16SrXlII y que las arvenses Cnidoscolus sp., L. camara, W americana y R mínima, son hospedantes alternativas y podrían desempeñar el papel de reservorio de los fitoplasmas que infectan al papayo. El insecto C. rotunda transmitió dos grupos de fitoplasmas a los papayos, por lo que podría ser uno de los vectores de dichos fitoplasmas en el campo.