Transformación genética de Capsicum chinense (Jacq.) mediante Agrobacterium tumefaciens / Laura Yesenia Solís Ramos

Tesis (Doctorado en Ciencias y Biotecnología de Plantas) .-- Centro de Investigación Científica de Yucatán, 2009.

C. chinense es una especie recalcitrante a la morfogénesis in vitro; sin embargo, hasta la fecha no hay un sistema eficiente y reproducible de transformación genética y de regeneración vía embriogénesis somática. Se llevaron a cabo experimentos para obtener in vitro plantas transformadas de C. chinense, mediante el cocultivo con Agrobacterium tumefaciens utilizando el gen heterólogo WUSCHEL de Arabidopsis thaliana. WUSCHEL promueve la transición del estado vegetativo al estado embrionario. La hipótesis evaluada fue que la transformación genética de C. chinense y la sobreexpresión del gen heterólogo WUSCHEL podía promover una respuesta embriogénica en esta especie. Se realizó el cocultivo de segmentos de embrión cigótico con la cepa C58C1 + pER10W-35Red de A. tumefaciens, la cual incluye el gen WUSCHEL regulado por el promotor inducible GAL4-ER con 17 ¡3-estradiol. Se obtuvieron in vitro, plantas transformadas de C. chinense con el gen heterólogo WUSCHEL, identificadas por PCR. Los segmentos de tallos transformados fueron tratados por inmersión con el inductor (17 f3-estradiol) en concentraciones de 10 ¡.tM Y 110 ¡.tM Y se colocaron en cultivos en fotoperiodo. Después de 15 días de cultivo, se observaron estructuras globulares en tallos tratados con el inductor a 10 ¡.tM Y después de 30 días los explantes tratados con 110 ¡.tM 17 f3-estradiol mostraron estructuras, dichas estructuras estuvieron ausentes en los explantes no inducidos. Esto sugiere que WUSCHEL promueve el desarrollo de tejido desdiferenciado en esta especie, lo cual puede ser una alternativa para resolver la recalcitrancia de esta especie de planta.