Clonación del promotor y región 5´ no traducible del gen psbD y elaboración de una construcción de expresión génica para el cloroplasto de Chlamydomonas reinhardtii / Shirley Bernardo Candelero

Tesis (I.B.) .-- Instituto Tecnológico de Mérida, 2010.

En los últimos años se ha demostrado que el uso de plantas como biorreactores tiene grandes ventajas en la producción de proteínas recombinantes, tales como: una alta producción de biomasa, poseen mecanismos de síntesis y secreción de proteínas, permiten el aumento en la escala de la producción de manera sencilla y requiere bajos costos de inversión, permiten el almacenamiento estable de la proteína recombinante en semillas y tubérculos facilitando su conservación, transporte y distribución y gozan de una mayor aceptación pública respecto de la manipulación de animales (Bravo et al., 2005). Por su parte, las microalgas han surgido en los últimos años como una alternativa atractiva para la producción de proteínas recombinantes de interés biotecnológico: médico, veterinario o industrial. Chlamydomonas reinhardtii es una microalga verde que ha servido de modelo en la investigación de fotosíntesis y otros aspectos fisiológicos por más de 60 años, y ha surgido recientemente como una alternativa con gran potencial para la producción de proteínas recombinantes. C. reinhardtii puede ser cultivada con facilidad, tiene un crecimiento rápido, económico, se puede producir a gran escala y es fácil de transformar y manipular por ingeniería genética. Esta microalga puede cultivarse en un medio simple de sales inorgánicas en la luz, aprovechando la fotosíntesis para obtener energía. También pueden crecer en oscuridad total si se le proporciona acetato como fuente de carbono (Rochaix, 1995). Por tanto, las microalgas verdes, y en especial C. reinhardtii, poseen las ventajas que ofrecen las plantas superiores como biorreactores, además de ventajas adicionales como son el escalamiento en un período de tiempo mucho menor, la purificación de proteínas de forma más sencilla, la reducción de desperdicios en términos de biomasa y un manejo seguro, ya que el cultivo se lleva a cabo de manera contenida evitando riesgos y controversia respecto al flujo génico.