Clonación y caracterización de homólogos de genes de resistencia (R) del tipo PTO en plátano / Lucio Valentín Rojas Polanco

Tesis (I.B.) .-- Instituto Tecnológico Superior del Sur del Estado de Yucatán, 2010.

El plátano es un alimento básico en numerosos países en desarrollo. Actualmente, la enfermedad foliar conocida como Sigatoka negra y causada por el hongo Mycosphaerella fijiensis es considerada como el problema fitosanitario más serio de este cultivo. Este patógeno se combate principalmente mediante el uso de pesticidas tóxicos que contaminan el medio ambiente y ponen en riesgo la salud humana. Las plantas son capaces de defenderse mediante mecanismos naturales de resistencia. En los últimos años, varios genes involucrados en la resistencia contra enfermedades en plantas han sido clonados, caracterizados y empleados en el mejoramiento genético de cultivos agrícolas. El gen Pto de tomate codifica para una proteína cinasa de serina y treonina que está involucrada en la resistencia contra patógenos biótrofos (Martin el al., 1993). El objetivo del presente trabajo fue evaluar la expresión de once secuencias tipo pto de plátano, así como de clonar la región 3´ terminal de los correspondientes ADN complementarios (ADNc) en un cultivar de plátano resistente a la Sigatoka negra. La evaluación de los once genes tipo pto se realizó mediante la técnica de RT -PCR y el aislamiento de la región 3´ Terminal mediante la técnica de RACE. Los resultados de la RT -PCR mostraron que de las once secuencias analizadas, nueve (tg 4, 6, 9, 12, 13, 67, 30, 2 Y 6) presentaron una expresión basal en tejido de hoja. En cuanto al aislamiento de los extremos 3´ de los ADNc de estudio, se logró la obtención de esta región en seis secuencias analizadas. Las secuencias 3´ Terminal obtenidas fueron traducidas in silico y se compararon en el banco de genes del centro nacional de información biotecnológica (NCBI, por sus siglas en ingles). Las secuencias tipo pto de las especies Ricinus communis, Capsicum chínense, Arabidopsis lhaliana, Glycine max, Manchartia polymorpha, Driza saliva japonica fueron las secuencias que presentaron el mayor porcentaje de similaridad con las secuencias tipo pto en plátano. La información generada en este trabajo permitirá en trabajos posteriores aislar los marcos de lectura abierto completos de los genes tipo pto de plátano y evaluar su potencial biotecnológico para combatir a la Sigatoka negra y otras enfermedades de plátano.