Transformación de tagetes erecta con el plasmido pCambia 2301 y pFGC1008::ISPH Agrobacterium tumefaciens / Gregorio Caamal Nic

Tesis (I.B.) .-- Instituto Tecnológico Superior del Sur del Estado de Yucatán, 2011.

Tagetes erecta L. es una planta herbácea anual perteneciente a la familia Astareceae, originaria de México. Su principal característica es la acumulación de carotenoides en las flores. Los carotenoides se utilizan como aditivos en la elaboración de alimentos para aves, peces y crustáceos para potenciar su pigmentación de su piel. Sin embargo existen estudios en los que se relacionan a los carotenoides con la prevención de algunas enfermedades ya que son precursores de la vitamina A, se consideran antioxidantes y fotoprotectores, jugando así un papel importante en la salud. La importancia de estos compuestos ha motivado la realización de estudios, sobre la expresión de genes carotenogenicos. En el presente trabajo tuvo como objetivo establecer las condiciones óptimas de la transformación de Tagetes erecta vía Agrobacterium tumefaciens con el plásmido pFGC1008 portador del gen isph usando pCAMBIA2301 portador del gen reportero gus como un control positivo. Para establecer un sistema de transformación se requiere conocer la sensibilidad del tejido aun antibiótico que será utilizado como un marcador de selección; se determinó que la concentración adecuada a utilizar en la selección de callo es el de 20 mg/L. Se observó, mediante el reactivo GUS, que la expresión transitoria del gen que codifica la f3-glucuronidasa (uidA), fue mayor en el D.O de crecimiento de cultivo de A. tumefaciens fue 0.6, en el tiempo de infección 15 minutos y el tiempo de cocultivo 5 días. Este trabajo sienta las bases para establecer las condiciones para la transformación estable en los explantes analizados.