Caracterización de proteínas tipo NLP a partir de cultivo in vitro de Phytophthora capsici / Mayra Alejandra Díaz Brito

Tesis (Maestría en Ciencias Biológicas : Opción Bioquímica y Biología Molecular) .-- Centro de Investigación Científica de Yucatán, 2012.

Los oomycetos como Phytophthora spp. producen efectores apoplásticos y citoplásmicos que modulan los procesos bioquímicos, morfológicos y fisiológicos del hospedante para establecer una infección exitosa. Entre los efectores de tipo apoplástico se encuentran los inhibidores de enzimas del hospedante, proteínas que interfieren con la adhesión entre la pared celular y la membrana plasmática del hospedante y toxinas que conducen a la muerte celular. Las toxinas incluyen a la familia de proteínas tipo Nep1 (NLPs). Nep1 es un polipéptido de 24 kDa purificado del filtrado de cultivo de Fusaríum oxysporum y reconocido como inductor de necrosis en varias dicotiledóneas. La presencia de efectores ha sido descrita en Bacillus spp., Erwinia spp., Verticillium spp., Pythium spp. y Phytophthora spp., y entre sus características se encuentra su capacidad para ocasionar necrosis en los hospedantes correspondientes. Recientemente se reportaron 18 genes de P. capsici que presentan homología con genes que codifican para NLPs presentes en otros patógenos. Sin embargo, los productos de los genes de P. capsici aún no han sido estudiados. Dado que estudios previos demuestran que el filtrado de cultivo de P. capsici tiene un efecto fitotóxico sobre hojas de Capsicum chínense, y con el fin de profundizar en el estudio de la interacción Phytophthora capsici-Capsicum chínense y la función que desempeñan los efectores secretados por P. capsici, en este trabajo se describe la purificación de proteínas inductoras de necrosis presentes en el filtrado de cultivo de P. capsici, usando los ensayos de actividad proteolítica y fitotóxica sobre hojas de C. chínense como guía, y la caracterización de una fracción proteica bioactiva.