Caracterización a nivel molecular de un transportador de NO3-de alta afinidad de chile habanero (Capsicum chinense Jacq.) y obtención de un vector de silenciamiento para su estudio funcional / Marta Guadalupe Lizama Gasca

Tesis (Maestría en Ciencias Biológicas : Opción Bioquímica y Biología Molecular) .-- Centro de Investigación Científica de Yucatán, 2012.

El nitrógeno (N) es uno de los nutrientes inorgánicos más importantes de las plantas y su poca disponibilidad es un factor limitante para el crecimiento de las plantas en la mayoría de los sistemas agrícolas. Este elemento puede ser absorbido por las raíces de las plantas en diferentes formas, principalmente como nitrato (N03"), amonio (NH4+), y formas orgánicas, siendo el N03" generalmente la forma más abundante de N. La absorción de N03" por las raíces desde el suelo es mediada por dos tipos de transportadores de nitrato (NRT), conocidos como NRT1 (transportadores de nitrato de baja afinidad) y NRT2 (transportadores de nitrato de alta afinidad). La familia de los NRT2 se ha identificado en diferentes organismos, tales como hongos, levaduras, cianobacterias y plantas, tales como la cebada, tabaco, soja y Arabidopsis. En Arabidopsis, hay siete genes del tipo NRT2, donde las proteínas AtNRT2.1 y AtNRT2.2 son las que tienen un papel más dominante en la toma de nitrato de alta afinidad. En respuesta a las concentraciones externas de N03", la expresión de NRT2.1 es frecuentemente inducida por la limitación de N03" y reprimida por una alta concentración de N. En este trabajo, se presenta la caracterización molecular de un transportador de N03" de alta afinidad de chile habanero y la obtención de un vector de silenciamiento para su posterior caracterización funcional. A partir de análisis, tanto moleculares como in silico, se obtuvo que los niveles de transcritos de CcNRT2.1, pueden ser regulados por N03", sacarosa, el período de fotoperíodo y luz. Por otro lado, se diseñó un vector de silenciamiento, usando al EuMV-YP, al cual se le integró una región de aproximadamente 448 pb del CcNRT2.1. A través del uso de esta metodología se podrá carectizar funcionalmente a esta proteína. Este transportador de nitrato de alta afinidad es el primero reportado para el género Capsicum. Las propiedades regulatorias de CcNRT2 ayudarán en un futuro a una mejor comprensión de la familia de los NRT2.