Aislamiento y evaluación antifúngica de hongos endófitos de Acalypha gaumeri pax y K. Hoffm / Marina Gómez Krupko

Tesis (Maestría en Ciencias Biológicas : Opción Biotecnología) .-- Centro de Investigación Científica de Yucatán, 2014.

Los hongos endófitos (HE) son microorganismos que habitan en el interior de las p antas sin causar síntomas visibles de enfermedad. Diversos beneficios se han reportado de la asociación HE-planta, como la resistencia a fitopatógenos mediante la producción de metabolitos secundarios. Por estas propiedades se ha planteado el uso de los HE como una estrategia de búsqueda de moléculas novedosas para el control de plagas y enfermedades. En este contorno, en la Unidad de Biotecnología del Centro de Investigación Científica de Yucatán se está desarrollando un estudio integral de Acalypha gaumeri, planta endémica de la región peninsular, con validadas propiedades antifúngicas contra varios fitopatógenos. Ante los escasos antecedentes sobre el estudio de los HE del género Acalypha, en el presente trabajo se planteó el objetivo de aislar y evaluar la actividad antifúngica de HE de hoja, tallo y raíz de A. gaumeri contra los hongos fitopatógenos (HF) Alternaría chrysanthemi y Colletotrichum gloeosporioides. La fase experimental incluyó cuatro etapas: a) aislamiento y purificación de HE, b) evaluación de HE en ensayos antagonistas contra A. chrysanthemi y C. gloeosporioides, c) identificación de HE antagonistas promisorios y d) evaluación antifúngica y perfil químico de los extractos de medio sólido y filtrados de medio líquido de los HE más activos. En total se obtuvieron 19 HE, de los cuales siete (MF5, MF9, MF11, MF12, MF13, MF17 y MF19) provocaron la inhibición del crecimiento micelial (> 60 por ciento) de al menos uno de los HF. Todas las cepas presentaron colonias estériles, lo que imposibilitó su identificación mediante métodos morfológicos tradicionales. Sin embargo, el análisis molecular de la región ITS guió a ubicar a las dos cepas de mayor actividad antagónica en el género Lasiodiplodia (MF5 y MF11) y a nivel de especie al MF11 como Lasiodiplodia theobromae MF11. Los extractos orgánicos obtenidos de los retos antagónicos en medio sólido PDA de las cepas MF5 y MF11 no tuvieron efecto antifúngico en el ensayo de microdilución contra los dos HF, por lo cual se realizaron co-cultivos en medio líquido. En la evaluación de los filtrados de la cepa MF11 se detectó una fuerte inhibición del crecimiento micelial (100 por ciento) con efecto fungistático en A. chrysanthemi y fungicida en C. gloeosporioides. Los análisis de Cromatografía Líquida de Alta Resolución de este filtrado mostraron la presencia de dos componentes polares (tR: 1.55 y 1.87 min) diferentes del blanco. El contenido de ambos se incrementa en los co-cultivos. Los resultados subrayan el potencial de la cepa MF11 como una alternativa natural para el combate de HF de importancia agrícola.