Producción de ácido betulínico en cultivos de raíces transformadas de Pentalinon andrieuxii (Mull. Arg.) Hansen & Wunderlin / Carlos Alberto Sandoval Antúnez

Tesis (Maestría en Ciencias Biológicas : Opción Bioquímica y Biología Molecular) .-- Centro de Investigación Científica de Yucatán, 2014.

El desarrollo de cultivos de tejidos vegetales y de técnicas de elicitación de metabolitos secundarios constituye una alternativa biotecnológica al cultivo de plantas completas para la obtención de productos valiosos (fitoquímicos). Tres son los sistemas de cultivo de tejidos vegetales frecuentemente considerados para la producción de metabolitos secundarios: las suspensiones celulares, células in movilizadas artificialmente y cultivo de raíces transformadas (CRT) o raíces pilosas ("Hairy-roots"), estas últimas son de interés particular debido a su capacidad de rápido crecimiento, de biosintetizar un amplio espectro de fitoquímicos, así como por su estabilidad genética y facilidad de mantenimiento. ~ichas características hacen del CRT, un modelo que permite una reducción en el tiempo requerido para lograr una producción eficiente de diferentes fitoquímicos deseados, existiendo también existe la posibilidad de obtener productos nuevos que no son sintetizados por las plantas de forma natural. Uno de estos valiosos fitoquímicos es el ácido betulínico (AS), un triterpeno pentacíclico tipo lupano que exhibe una gran variedad de propiedades biológicas (Ieishmanicida, antiinflamatorio, antiedémico, anticancerígeno, antibacteriano, antiviral). Recientemente se reportó el aislamiento de AS a partir de extractos de hoja de Pentalinon andrieuxii, una planta de la familia Apocynaceae que se encuentra distribuida a lo largo de la tierra caliente del este de México hasta Centroamérica. En este trabajo se logró el establecimiento de cuatro líneas de cultivos de raíces transformadas de P. andrieuxii a partir de explantes de hojas infectados con Agrobacterium rhizogenes ATCC15834. Los cultivos se caracterizaron en su crecimiento vs tiempo estableciendo el día 30 de cultivo como el punto de producción máxima de biomasa de las cuatro líneas. La presencia de AS en extractos o fracciones se detectó por CCO y HPLC y ambos métodos se utilizaron para evaluar y comparar el efecto de ácido jasmónico y sulfato de vanadilo (100, 200 Y 400 IJM) en la producción de AS, siguiendo un curso temporal de cosecha post-elicitación de 24, 48 Y 72 h, cuantificando la producción de ácido betulínico en la línea O (línea de mayor producción de biomasa) de los cultivos de raíces transformadas de Pentalinon andrieuxii.