Determinación del efecto de los fosfoinosítidos sobre la interacción entre la fibrilarina con U3 snoRNA / Cecilia Aquino Pérez

Tesis (L.B.) .-- Universidad Autónoma de Ciudad Juárez, 2014.

La fibrilarina es una proteína vital en todo organismo eucariota. Se localiza en el componente fibrilar denso y en los cuerpos cajales donde interactúa con los pequeños ARNs nucleolares o snoRNAs (small nucleolar RNAs) con quienes conforma complejos ribonucleoprotéicos o snoRNPs (Ribonucleoproteic complexes), los cuales participan durante el procesamiento y maduración del ARNr. El chaperón U3 snoRNA (caja C/D) presenta su concentración más alta en el componente fibrilar denso de nucléolos activos donde a su vez colocaliza con la fibrilarina; lo que implica una interacción dentro de un snoRNP. Se sugiere que pueden existir zonas con un ambiente hidrofóbico dentro del nucléolo donde ocurren asociaciones proteína-lípido-ARN en las cuales un fosfoinosítido actúa como un agente estimulador o estabilizador. Para determinar el efecto directo que tienen los fosfoinosítidos (específicamente el Fosfatidil 4,5 bisfosfato o PIP2) durante la interacción Fibrilarina-U3 se llevaron a cabo ensayos de cambio de movilidad electroforética o EMSA (Electrophoresis Movility Shift Assay). Estos ensayos demostraron que la incidencia de un cambio parcial en la movilidad electroforética resultante de la unión de U3 snoRNA a la Fibrilarina comparado con el bandeo característico de U3 snoRNA libre, sugiere que la mayoría de los ARN producidos están unidos a la Fibrilarina, un fenómeno que se ve afectado por la presencia de PIP2; esto nos permite determinar que la presencia de PIP2 confiere un cambio de actividad enzimática a la Fibrilarina, el cual podría ser de metil transferasa a defosforilaza a ARNasa, o a endonucleasa.