Clonación y caracterización molecular del gen CrPAP1 que codifica para una proteína tipo fosfatasa ácida purpura de la microalga Chlamydomonas reinhardtii [recurso electrónico] / Margarita Isabel Pérez Díaz

Tesis (I.B.) .-- Instituto Tecnológico de Mérida, 2014.

Debido a que el fósforo (P) es un nutriente importante para los seres vivos, además de que es un componente esencial de moléculas clave como los ácidos nucleicos, fosfolípidos y el ATP, los organismos no pueden crecer de manera eficiente sin una fuente disponible de dicho nutriente. Las fitasas son enzimas ampliamente utilizadas como suplemento en el alimento de animales monogástricos de granja (aves de corral, cerdos y peces), para la obtención del P almacenado en forma de fitato en su alimento, ya que estos animales no contienen fitasas en su sistema digestivo. La microalga verde Chlamydomonas reinhardtii ha sido utilizada como modelo en estudios fisiológicos, bioquímicos y genéticos, además de que es considerada como un sistema de expresión de proteínas recombinantes atractivo debido a su cultivo fácil y económico, rápido escalamiento, y posibilidad de manipulación por ingeniería genética. Estudios previos en C. reinhardtii, han demostrado que ésta microalga es capaz de crecer en presencia de Fitati (IP6) como única fuente de P, además de que se ha reportado la presencia de secuencias de fitasas tipo Fosfatasas Ácidas Purpura en el genoma de C. reinhardtii, pero es necesario el estudio de los genes involucrados en este proceso. En este trabajo se clonó la región codificante del ADN complementario (ADNc) del gen CrPAP1 de C. reinhardtii que codifica para una Fosfatasa Ácida Purpura, el cual se subclonó en un vector de expresión bajo el control de un promotor que conduce una alta expresión obteniéndose el plásmido ptCrPAP1 que se utilizó para la trasformación del núcleo de la microalga verde Chlamydomonas reinhardtii.