Efecto del AIA y el 2,4-D en la modulación epigenética de los genes ARF en Agave spp. / Víctor de Jesús Cancino García

Tesis (Maestría en Ciencias Biológicas : Opción Biotecnología) .-- Centro de Investigación Científica de Yucatán, 2015.

En el Centro de Investigación Científica de Yucatán, dentro de su programa de mejoramiento del género Agave, se ha desarrollado exitosamente la técnica para su micropropagación. El Agave es una especie originaria de México con un alto valor comercial, ya que especies pertenecientes a este género como A. tequilana, A. angustifolia y A. fourcroydes son usadas en la industria tequilera, mezcalera y textil, respectivamente. Este programa se ha desarrollado exitosamente mediante protocolos de micropropagación, con el uso de diferentes reguladores de crecimiento; sin embargo, se ha observado que las plantas presentan diferentes fenotipos dependiendo de las auxinas a las que son expuestas durante la micropropagación, las cuales son más evidentes una vez que las plantas están en condiciones de campo. Estudios en otras especies han demostrado que los reguladores de crecimiento, principalmente de naturaleza auxínica, promueven la metilación del ADN, causando cambios epigenéticos. Estudios en el laboratorio han mostrado que las auxinas, en particular el ácido 2,4-diclorofenoxiacético (2,4-D), propicia una mayor altura en A. tequilana, un mayor número de hojas en A. fourcroydes y un mayor peso en A. angusfifolia y A. fourcroydes. Todos estos resultados se obtuvieron a los 21 días del experimento (Duarte-Ake, 2013). Se realizó un análisis filogenético de los transcritos que codifican a los Factores de Respuesta a Auxinas (ARF) en Agave tequilana Weber varo azul y se encontraron 32, de los cuales 23 fueron transcripcionalmente activos. Se lograron aislar cinco genes ARF putativos ARF1, ARF2a, ARF5, ARF7a y ARF17 en las tres especies de Agave, a los cuales se les midió su expresión relativa a los O, 3 Y 21 días en presencia y ausencia de las auxinas ácido 3indolacético (AlA) y ácido 2,4-diclorofenoxiacético (2,4-D). Se encontró que ARF1 y ARF5 mostraron una expresión diferencial dependiendo de la especie y el tiempo de tratamiento con las auxinas. Se encontró por medio de la immunoprecipitación de la cromatina (ChiP) que éstos genes estaban regulados por las marcas H3K9me2 y que esa regulación es diferente en cada especie.