Transformación genética de Pentalinon andrieuxii con el gen truncado de la HMGR de Arabidopsis thaliana / Yeseña Beatriz Burgos May

Tesis (Maestría en Ciencias Biológicas : Opción Bioquímica y Biología Molecular) .-- Centro de Investigación Científica de Yucatán, 2015.

La transformación genética de plantas es una herramienta que se ha ido desarrollando en el transcurso de los últimos años, que permite realizar modificaciones en el genoma de las plantas que han sido utilizadas como modelo de estudio. Las modificaciones que adquieren son diversas, entre éstas están la resistencia al estrés por causas ambientales, la resistencia a patógenos o herbicidas, la producción de pigmentos que naturalmente no son sintetizados por la planta, y la sobreproducción de metabolitos secundarios, entre otros. Estas modificaciones pueden contribuir al mejoramiento genético de la especie en cuestión. Un modelo susceptible a la transformación es Pentalinon andrieuxii, perteneciente a la familia de las Apocynaceae, una planta utilizada en la medicina tradicional debido a que posee propiedades biológicas. Estudios recientes demuestran que esta planta nativa produce derivados del ácido betulínico y esteroles derivados del colesterol, reconocidos por sus propiedades anticancerígena y leishmanicida, respectivamente, por lo que esta especie representa una fuente natural importante para extraer este tipo de metabolitos con potencial aplicación en la industria farmacéutica. En este trabajo se estableció un protocolo de transformación genética estable para Pentalinon andrieuxii con el gen reportero GUS (pCAMBIA 2301), el cual se empleó para la transformación de la especie con el gen truncado de la HMGR de Arabidopsis thaliana, vía Agrobacterium tumefaciens. Se comprobó la transformación de 5 líneas mediante PCR amplificando un fragmento de 658 pb que representa el gen 35S-5´-HMGR truncada. A las líneas que dieron positivo a la prueba de PCR se detectó la presencia del ácido betulinico mediante CCD, donde se observó la presencia de ácido betulinico en las líneas transgénicas, al igual que otros compuestos.