TY - BOOK AU - Caamal Velázquez,José Humberto AU - Rodríguez García,Cecilia Mónica TI - Estimación del tamaño genómico de Mycosphaerella fijiensis por enzimas de restricción de corte raro PY - 2003/// CY - Mérida, Yuc., KW - MYCOSPHAERELLA FIJIENSIS KW - ENFERMEDADES Y PLAGAS KW - PATOLOGIA VEGETAL KW - PLATANO KW - SIGATOKA NEGRA N1 - Tesis (Q.F.B.) .-- UADY. Facultad de Química, 2003 N2 - El cultivo de Plátano y Banano en nuestro país es una de las actividades económicas más, importantes, esta actividad agrícola se encuentra amenazada principalmente por la enfermedad foliar denominada Sigatoka negra, que actualmente se encuentra distribuida en todas las regiones bananeras de nuestro país. El combate de esta enfermedad supera el 35 por ciento de los costos de producción del cultivo. El patógeno causante de la Sigatoka negra es el hongo ascomiceto Mycosphaerella fijiensis. Se han realizado diversos estudios para contrarrestar esta enfermedad, tanto en banano como en el patógeno que la causa, en el presente trabajo se propuso estimar el tamaño genómico de tres aislados diferentes de M fijiensis. Para esto, los ADN genómicos (ADNg) de los aislados se sometieron a una digestión enzimática completa. Se probaron diferentes metodologías para incluir micelio del hongo en bloquecitos de azarosa ("plugs"), con el fin de que el ADNg no se dafiara. Los "plugs" se incubaron en proteinasa K con el fin de romper las paredes del hongo y así exponer el ADNg del micelio a la acción de las enzimas de restricción seleccionadas. Posteriormente se estandarizó la técnica para eliminar la proteinasa K mediante lavados con fluoruro de fennilmetil sulfonilo (PMSF). Finalmente se estableció el protocolo para la digestión del ADNg contenido en los "plugs" con las enzimas Eco RI, Swa I y Not l. Para el análisis de las digestiones se utilizó un sistema de electroforesis de campo pulsante, CHEF MAPPER@ (Contour-clamped Homogeneous Electric Field). Las pruebas con diferentes condiciones para la electroforesis con el sistema CHEF MAPPER@, permitieron separar fragmentos de ADN grandes producidos con las enzimas de restricción sobre los ADNg de las tres líneas de M fijiensis. El perfil de restricción reveló por lo menos 19 fragmentos para el aislado procedente del estado de Tabasco, 13 fragmentos para el aislado procedente del estado de Chiapas y 10 fragmentos para el estado de Veracruz con la enzima SwaI. Analizando los resultados se concluyó que existe diferencia en el perfil de restricción (polimorfismo) de los aislados seleccionados. El polimorfismo se observa también cuando se analizan los cromosomas intactos; nuestro trabajo muestra que el polimorfismo ocurre también a nivel de patrones de restricción ("fingerprinting") UR - https://www.cicy.mx/sitios/sib/doctoelectronico/5001.pdf ER -