Purificación y caracterización de la proteina p47 del endospermo sólido de Cocos nucifera (L.) /
José Eduardo Bestard Barrera
- xi, 58 h. : il. ; 28 cm.
Tesis (L.B.) .-- UADY. Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia, 2005.
Desde el punto de vista económico el endospermo sólido de cocotero es importante porque a partir del mismo se obtiene el aceite de copra, el cual tiene diferentes aplicaciones industriales. Este tejido también tiene importancia bioquímica y molecular ya que es un tejido especializado en la acumulación de lípidos, carbohidratos y proteínas, entre estas últimas podemos encontrar a las proteínas de reserva y las proteínas cinasas que desempeñan un papel importante en los procesos de desarrollo y germinación de la semilla. En este trabajo se realizaron ensayos de electroforesis de proteínas en geles nativos de poliacrílamida (PAGE) , geles disociantes de poliacrílamida (SDS-PAGE) y geles de isoelectroenfoque. El patrón de proteína se reveló utilizando distintos métodos de tinción. Con el fin de purificar y caracterizar a una proteína de reserva de 47 kDa (p47) del endospermo sólido del cocotero, se realizaron cromatografías en columna, ensayos de glucosilación y se estimo el punto isoelectrico (pl) de las isoformas encontradas. Se realizaron ensayos de fosforilación con 32Py_[A TP] para poder determinar las características de p47 como proteína cínasa. A partir del endospermo sólido del cocotero se purificó a p4 7 Y se generó un anticuerpo policJonal contra la misma. El anti-p47 producido se utilizó para detectar a su antígeno en los tejidos de embrión, plúmula (meristemo apical del embrión cigótico) y callos embriogénicos y no embriogénicos de la misma especie. Se determinó que p4 7 está glucosilada y que existen al menos dos isoformas de esta proteína con puntos isoelectricos de 6.75 Y 6.8. También se determinó que p47 presenta características enzimáticas y de inmunoreconocimiento que la asocian con el grupo de las cinasas activadas por mitogenos (MAPK)