Embriogénesis somática de Agave en biorreactores de inmersión temporal /
Kelly Maribel Monja Mio
- viii, 171 p. : il. ; 2013
Tesis (Doctorado en Ciencias Biológicas : Opción Biotecnología) .-- Centro de Investigación Científica de Yucatán, 2013.
El presente estudio revela Información sobre la embriogénesis somática (ES) en especies de importancia económica del género Agave como lo son A. tequilana y A. fourcroydes. Esta información abre las posibilidades para su aplicación en la micro propagación automatizada de estas especies, mediante sistemas de inmersión temporal; además, puede ser utilizada como modelo para futuros trabajos de mejora genética y estudios epigenéticos. En A. fourcroydes, la producción de embriones fue de forma directa, utilizando segmentos delgados de tallos (TCLs) de plántulas cultivadas in vitro como explantes y dicamba (2.26 uM) como auxina de inducción. La inducción de la ES en A. fourcroydes se obtuvo tanto en los biorreactores BioMINTs como en RITAs. Un sistema eficaz de regeneración de plantas mediante la embriogénesis secundaria (ESS), utilizando como explantes los embriones somáticos originados de los TCLS, fue obtenida al cultivar los embriones en biorreactores RITAS. En A. tequilana, la regeneración de plantas vía ES ocurrió de manera indirecta. Los explantes utilizados también fueron tTCL de tallos de vitroplántulas, pero el regulador de inducción difiere del utilizado en A. fourcroydes, en este caso se empleó la combinación de picloram (4.14 uM) y BA (44.4 uM). La inducción de callos también se logró en biorreactores BioMINT y los callos obtenidos regeneraron plántulas más rápido que aquellos originados en sistemas semisólidos. La frecuencia de inmersión que produjo mayor biomasa (callo embriogénico) fue la 1 min cada 4 h. El protocolo de A. fourcroydes permitió seleccionar clonas altamanente embriogénicas y no embriogénicas. Mediante estudios epigenéticos (metilación de ADN e histonas) se determinó que existen diferencias entre ellas durante el proceso embriogénico. El desarrollo de las plántulas cultivadas in vitro durante su traspaso a campo, también fue evaluado, observándose el desarrollo de los estomas, densidad estomática y deposición de ceras epicuticulares.