Caracterización de la expresión diferencial en respuesta a temperaturas extremas de genes RAP2.4 presentes en savia de (Carica papaya L. cultivar Maradol Roja) /
Luis Joel Figueroa Yáñez
- vi, 144 p. : il. ; 28 cm.
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Tesis (Doctorado en Ciencias Biológicas : Opción Biotecnología) .-- Centro de Investigación Científica de Yucatán, 2014.
La identificación de los factores de transcripción que median la respuesta a un estrés abiótico son de fundamental importancia en el conocimiento de la adaptación de las plantas al ambiente. Los factores de transcripción interactúan con elementos en cis de las regiones promotoras de varios genes relacionados al estrés para regular su expresión, dando así la tolerancia al estrés (Agarwal and Jha, 2010). En general, son siete superfamilias de genes relacionados al estrés abiótico, entre ellas encontramos, los cierres de leucina (bZIP), los factores de unión en respuesta a etileno APETALA 2 (AP2/ERF), los NAM/ATAF1/CUC2 (NAC), los WRKY, los MYB, los factores de tipo Cys2(C2)His2(H2)-tipo dedos de zinc (ZFs) y los hélice-bucle-hélice básica (bHLH). Los factores de transcripción que pertenecen a la superfamilia AP2/ERF son: a) los AP2 (los cuales tienen 2 dominios AP2), b) los RAV (que cuentan con un dominio B3) y c) los ERF (con solo un dominio AP2). Los genes Rap2.4 pertenecen a la familia ERF y son nombrados así en referencia a que están relacionados a APETALA2. Ellos fueron caracterizados por primera vez por Okamuro et al., en 1997, en Arabidopsis thaliana. En este estudio se realizaron análisis in silico, análisis de expresión diferencial, de traducción in vitro, así como de localización y translocación de proteínas a través de injertos de seis genes tipo Rap2.4 de Carica papaya. Los resultados obtenidos muestran que los genes CpRAP2.4 se expresan de manera diferencial en plantas y savia de papaya expuestas a temperaturas extremas, también se logró determinar la localización de las proteínas CpRAP2.4 en el floema y raíces de plantas de tabaco transgénicas 35S::CpRAP2.4::GFP. En injertos de Nicotiana benthamiana transformadas y sin transformar se realizaron análisis por PCR´s y pudimos observar amplicones tanto del gen de resistencia a kanamicina como del RAP2.4D en los injertos, lo cual nos señala claramente que hay transferencia de material genético de un lugar a otro de las plantas injertadas. Por último, se realizó un análisis de traducción de proteínas tomando savia de Carica papaya y al añadir un ARNm la prueba salió positiva, lo cual indica que en la savia de Carica papaya, existe una maquinaria de traducción de la cual no existía referencias anteriormente
CARICA PAPAYA--EMBRIOGENESIS SOMATICA PAPAYA MARADOL PLANTAS--EFECTO DEL ESTRES