Implementación de la metodología de Far Western en proteínas de semilla de chile habanero utilizando como sonda la fracción G10P1.7.57 o al polipéptido CchDINGp39kDa / Rita Ramona Uc Ku

Tesis (I.B.) .-- Instituto Tecnológico Superior de Calkiní, 2014.

Desde la antiguedad, los Mayas han utilizado diferentes partes del chile habanero (Capsicum chinense Jacq.) para combatir infecciones de la piel, dolor de dientes, heridas y quemaduras (Cichewicz y Thorpe, 1996). El efecto antimicrobiano del chile habanero había sido asociado, hasta hace algunos años, principalmente a la presencia de altas concentraciones de capsaicina y dihidrocapsaicina, dos compuestos cuya actividad biológica ha sido ampliamente documentada (Surh y Lee, 1995). En el grupo de investigación hemos encontrado que las semillas de chile habanero son fuente de péptidos antimicrobianos (Brito-Argáez et al., 2009) y que por ello dichos péptidos pueden ser la base para el diseño de agroquímicos naturales o de aplicación en la medicina para el control de patógenos. Mediante cromatografía en columna, a partir del extracto total de semillas, se obtuvo una fracción denominada G10P1.7.57, que in vitro, mostró una elevada actividad antimicrobiana contra Pseudomonas syringae, Xanthomonas campestris, Erwinia carotovora, Agrobacterium sp, Pseudomonas aeruginosa, Shigella fIexnerii, Escherichia coli, Bacillus subtilis y Staphylococcus aureus; las 5 primeras son bacterias patógenas de plantas y las restantes son de humanos, (Brito-Argáez et al., 2009). El análisis de la fracción G10P1.7.57 mostró que ésta se compone de 5 péptidos, uno mayoritario de 7.57 kDa. Nuestro grupo generó anticuerpos policlonales contra los componentes proteicos de la fracción G10P1.7.57 (Díaz-Brito et al., 2009), y se determinó que el anticuerpo policlonal es capaz de reconocer al péptido de 7.57 kDa, tanto en la muestra de la fracción G 1 OP 1. 7.57 como en el extracto proteico total de la semilla. El fraccionamiento de G1 OP1. 7 .57 por isoelectroenfoque y la posterior secuenciación de aminoácidos de la fracción G10P1.7.57, mostró que el péptido de -7.57 kDa (el más abundante en la fracción) tiene homología con las proteínas DING.