000			02379nam a2200277Ia 4500
001			000005030
003			MX-MdCICY
005			20241009163742.0
008			010617c2004----mx-a###f#m---#000-0#SPA-#
040			_cCICY
090			_aTL _bA52 2004
100	1		_aAlcocer Quian, Guillermo
245	1	0	_aEstandarización de la técnica de RT-PCR in situ para detectar genes involucrados en el control del ciclo celular en cultivos in vitro de cocotero / _cGuillermo Alcocer Quian
264	3	1	_aMérida, Yuc., _c2004
300			_a48 p. : _bil. ; _c28 cm.
502			_aTesis (Q.F.B.) .-- UADY. Facultad de Química, 2004.
520	3		_aLa técnica de Reacción en Cadena de la Polimerasa, con Transcriptasa reversa in situ es una variante de PCR in situ, que en la actualidad está siendo utilizada para la detección y localización de ARN mensajeros en tejidos de diversos organismos incluyendo a las plantas. En el presente estudio se intento estandarizar la técnica de RT -PCR in situ en explantes de plúmulas de cocotero cultivadas in vitro, utilizando el gen del COKA, cuyo producto es una proteína involucrada en el control del ciclo celular. Los resultados mostraron que la técnica de fijación empleada y la impregnación en parafina fueron adecuadas para los tejidos de cocotero. El tiempo óptimo de incubación con Pronasa E fue de 2-3 minutos. La concentración óptima de anticuerpos fue de 6.0 U/mL de TBS 1 por ciento BSA. Sin embargo en los cortes histológicos realizados se encontró mucha señal de fondo en los controles negativos. Ni la adición de mayor concentración de ADNasa I o la utilización de pectinasa disminuyó la señal de fondo en los controles negativos. Sin embargo los resultados de la presente tesis permiten contemplar otras estrategias para realizar la detección in situ de los genes de interés como utilizar DIG-11-UTP marcada con 33fósforo o estandarizar la técnica de hibridación in situ.
650	1	4	_aCOCOTERO _xCULTIVOS Y MEDIOS DE CULTIVO
650	1	4	_aCOCOTERO _xEMBRIOGENESIS SOMATICA
650	1	4	_aCOCOTERO _xMICROPROPAGACION
650	1	4	_aCOCOTERO _xPROPAGACION IN VITRO
650	1	4	_aMARCADORES MOLECULARES
700	1	2	_aAguilar Espinosa, Margarita de Lourdes, _cM.C., _eAsesor de tesis
856	4	0	_uhttps://www.cicy.mx/sitios/sib/doctoelectronico/5030.pdf _zVer tabla de contenido y/o resumen
942			_2Loc _cTE
999			_c4981 _d4981