000 03140nam a2200265Ia 4500
001 000005260
003 MX-MdCICY
005 20260115142837.0
008 130306s2006 mx a f p 000 0 spa d
040 _cCICY
090 _aTL
_bA965 2006
100 1 _aAyuso Cano, William Israel
245 1 0 _aAmplificación rápida de los extremos terminales (race 3´ y 5´) del gen de la fosfolipasa C en células de cafeto en suspensión /
_cWilliam Israel Ayuso Cano
264 3 1 _aMérida, Yuc.,
_c2006
300 _a68 h. :
_bil. ;
_c28 cm.
502 _aTesis (Q.F.B.) .-- UADY. Facultad de Química, 2006.
520 3 _aEl conocimiento de la secuencia de bases que codifica una molécula de una proteína funcional representa un gran avance para la ciencia básica pues, a pesar de ocupar un pequeño espacio en el cromo soma, contiene suficiente información de la que se derivan respuestas para una gran variedad de preguntas como por ejemplo: ¿ Cuál es el origen de algunas enfermedades hereditarias?, ¿Por qué algunos organismos tienen características diferentes en su desarrollo?, ¿Por qué unos organismos son inmunes a enfermedades y otros no? La importancia de este conocimiento radica en la aportación de las herramientas necesarias para resolver los problemas que se presentan para una mejor manera de sobrevivencia. El presente trabajo se refiere a una de las estrategias establecidas para el conocimiento de la secuencia de un gen; particularmente, el gen que codifica una enzima que se encuentra involucrada en algunos procesos celulares de las plantas. Se utilizó la técnica conocida como Amplificación rápida de los extremos terminales (RACE por sus siglas en inglés; Rapid Amplification of cDNA Ends) para completar la secuencia de un gen de la fosfolipasa C (PLC) de células en suspensión de cafeto. Se sintetizó el ADNc por transcripción reversa a partir de ARN total de células en suspensión de 14 días de cultivo. La síntesis del ADNc se realizó incluyendo secuencias de nucleótidos conocidas tanto en el extremo 5´ como en el 3´ que posteriormente se utilizaron como sitio de anclaje para .1os cebadores específicos. La Amplificación se realizó por la PCR utilizando cebadores (en sentido y antisentido) específicos para la fosfolipasa C en combinación con un cebador (en sentido y antisentido) específico para la secuencia ligada al ADNc sintetizado. En los experimentos para la amplificación rápida del extremo 5´, se obtuvo la amplificación de un fragmento de aprox. 1100 pb cumpliendo nuestras expectativas. Este fragmento se clonó, se analizó y actualmente se encuentra en secuenciación. En relación a los experimentos de RACE 3´, no se obtuvieron resultados favorables.
650 1 4 _aCAFE
_xCULTIVO Y MEDIOS DE CULTIVO
650 1 4 _aCAFE
_xEMBRIOGENESIS SOMATICA
650 1 4 _aCAFE
_xINVESTIGACIONES
700 1 2 _aMuñoz Sánchez, José Armando,
_cM.C.,
_eAsesor de tesis
700 1 2 _aSantos Briones, César de los,
_cDr.,
_eAsesor de tesis
856 4 0 _uhttps://www.cicy.mx/sitios/sib/doctoelectronico/5260.pdf
_zVer tabla de contenido y/o resumen
942 _2Loc
_cTE
999 _c5206
_d5206