Metabolitos antituberculosos de Diospyros anisandra Blake y Gliocladium sp. MR41 / Andrés Humberto Uc Cachón

Tesis (Doctorado en Ciencias y Biotecnología de Plantas) .-- Centro de Investigación Científica de Yucatán, 2012.

En estudios previos realizados en el laboratorio de Biofármacos y Biopesticidas del Centro de Investigación Científica de Yucatán en colaboración con los laboratorios de Farmacognosia del Centro de Investigación Biomédica del Noreste del IMSS se encontró que el extracto hexánico de corteza de Diospyros anisandra y el extracto de acetato de etilo de la cepa fúngica Gliocladium sp. presentaron una importante actividad antituberculosa (anti-TB). Con base en lo anterior se planteó como objetivo la purificación e identificación de los metabolitos secundarios presentes en dichos extractos. El análisis fitoquímico del extracto de la corteza de tallo de D. anisandra llevó al aislamiento e identificación de 15 compuestos: una nueva naftoquinona dimérica (epóxido de zeylanona), tres naftoquinonas monoméricas (plumbagina, c/´s-isoshinanolona y droserona), cuatro naftoquinonas dimericas (maritinona, 3,3´-biplumbagina, eliptinona y chitranona), cuatro triterpenos de tipo lupano (lupeol, betulina, aldehido de betulina y ácido betulínico), y tres sesquiterpenos, dos de ellos reportados por primera vez en la familia Ebenaceae (4(15), 5E, 10(14)-germacratrien-1(3-ol y tecdiol A) y otro aislado previamente de hojas de D. melanoxylon (selin-4(15)-en-1(3, 11-diol). De la evaluación anti-TB, las naftoquinonas plumbagina, maritinona y 3,3´-biplumbagina resultaron activas frente a las cepas de M. tuberculosis H37Rv (sensible a los fármacos de primera línea) y CIBIN-UMF 15:99 (resistente). Estos compuestos presentaron una concentración mínima inhibitoria (CMI) en el rango de 1.56-3.13 ug/ml_. La droserona, el epóxido de zeylanona y el aldehido de betulina presentaron moderada actividad sobre la cepa resistente (CMI de 25 ug/mL, 12.5 ug/mL y 25 ug/mL, respectivamente). Los compuestos activos fueron evaluados sobre la línea celular Vero {Cercopithecus aethiops, ATCC No CC-81) y células adherentes humanas. Las naftoquinonas maritinona y 3,3´-biplumbagina resultaron inocuas sobre las células Vero. Por el contrario las naftoquinonas plumbagina, droserona, c/s-isoshinanolona y eliptinona resultaron ser citotóxicas (IC50 = 0.75-3.73 ug/mL). Por otra parte, ninguna de las naftoquinonas resultó citotóxica sobre las células adherentes humanas (Cl50 z 125 ug/mL), lo que confirma PI potencial de estas naftoquinonas como modelos estructurales para el diseño de nuevos fármacos anti-TB. En el caso de la cepa fúngica las fracciones de AcN presentaron una alta variabilidad en la actividad sobre la cepa sensible de M. tuberculosis (CMIs = 3.13 a 50 ug/mL). El análisis químico de las fracciones de AcN permitió la purificación de dos nuevos compuestos: el 2-¡sopropil-5-benzofuranol y un estereoisómero del 1,6-di-0-acetil-2,3,4,5-tetrahidroxihexano, y tres compuestos conocidos: alitol, ergosterol y endoperóxido de ergosterol.